▋產品簡介：
酵母雙雜的原理基礎：很多真核生物的位點特異轉錄激活因子通常具有兩個可分割開的結構域，即 DNA 特異結合域（DNA-binding domain, BD）與轉錄激活域（Transcriptional activationdomain, AD）。這兩個結構域各具功能，互不影響。但一個完整的激活特定基因表達的激活因子必須同時含有這兩個結構域，否則無法完成激活功能。不同來源激活因子的 BD 區(qū)與 AD 結合后則特異地激活被 BD 結合的基因表達?；谶@個原理，可將兩個待測蛋白分別與這兩個結構域建成融合蛋白，并共表達于同一個酵母細胞內。如果兩個待測蛋白間能發(fā)生相互作用，就會通過待測蛋白的橋梁作用使 AD 與 BD 形成一個完整的轉錄激活因子并激活相應的報告基因表達。通過對報告基因表型的測定可以很容易地知道待測蛋白系統(tǒng)。分子間是否發(fā)生了相互作用。
酵母雙雜交系統(tǒng)由三個部分組成 ∶（1）與 BD 融合的蛋白表達載體，被表達的蛋白稱誘餌蛋白(bait)。（2）與 AD 融合的蛋白表達載體，被其表達的蛋白稱靶蛋白（prey）。（3）帶有一個或多個報告基因的宿主菌株。常用的報告基因有 HIS3，URA3，LacZ 和 ADE2 等。而菌株則具有相應的缺陷型。雙雜交質粒上分別帶有不同的抗性基因和營養(yǎng)標記基因。這些有利于實驗后期雜交質粒的鑒定與分離。根據(jù)目前通用的系統(tǒng)中 BD 來源的不同主要分為 GAL4 系統(tǒng)和 LexA 系統(tǒng)，目前常用的是 Y2HGold-GAL4 和 AH109-GAL4 系統(tǒng)。
Y2HGold 菌株是 GAL4 系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATa 型，可直接轉化質?；蚺c MATα 型酵母菌株 Y187 通過 mating 操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker 為：trp1，leu2，報告基因為： AbAr，HIS3，ADE2，MEL1。Y2HGold-GAL4 酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質粒配套使用：pGBKT7 和 pGADT7 。 質粒 pGBKT7 的篩選標志為 TRP1，用于表達 DNA-BD（來自酵母轉錄因子 GAL4N 端 1~174 位氨基酸） 與目標蛋白（Bait）的融合蛋白；質粒 pGADT7 的篩選標志為 LEU，用于表達 AD（GAL4 C 端 768~881 位氨基酸）與目標蛋白（Prey）的融合蛋白。
▋運輸及儲存條件：
培養(yǎng)基系列保質期2年，鑒定試劑盒、甘油菌保質期1年，感受態(tài)保質期3個月；感受態(tài)干冰運輸，其余產品冰袋運輸；各類產品按照標簽所示溫度進行儲存。
